Reprise du message précédent :

sauf si le tech est un néanderthalien  

 
Le nutritionniste je sais meme pas si ça existe dans mon coin... (province) mais je suis tres/trop specifique question regime...  
 
suis pas fan des piqures ,je vais eviter de l'injecter, meme en lavement... (du a quoi le risque ?,un "choc" du a l'acidité ? )
 
En fait j'ai retrouvé mon stress (dextrogyre= pas ou peu d'activité vitaminique) :
http://forum.lixium.fr/v-10464427.htm  en fait la secretaire a du se melanger les pinceaux dans les termes...  
mais d'apres le codex et la notice c'est la bonne bete , http://news.reseau-concept.net/ima [...] 000_18.pdf
 
...du coup un mois au placard le sachet,failli le bazarder...

yen a partout dans tous les CHU ! c'est étrange ton truc/requête  

non mais j'ai pas trop cherché en fait ...  
,je suis dans une petite ville et les vrais competences sont rares ...l'hopital etant pire que tout...
(sinon question régime ,je suis intolerant a 80%/90% de la bouffe +transit perturbé ,peu de fruit legume sinon c'est le boxon,le nutri il se pend  )  
 
La depuis 3ans j'avais laissé tout ça un peu de coté,la tete dans le guidon sur un projet (disons ,que y'avais des choix a faire),mais la ,la réalité me rattrape ... carence a recombler d'urgence ne serait ce que pour mes nonos /immunité

Marrant de voir comment ceux qui n'arrêtent pas de pester contre lemodedevieàl'occidentale sont les premiers à réclamer leur petite pilule, tout en s'inscrivant dans la démarche du toujours moins cher

Je ne suis pas bien certain de pouvoir apporter une réponse à ta question mais je suis curieux... Expérimentalement, comment ça se passe? Dans quel système cellulaire travailles tu? Comment tu fais pour injecter des microsomes "avant" ou "après" traduction?

 
Tu en es vraiment sur ?
 

Difficile a dire sans en savoir plus sur la proteine, sans plus d'infos on estoblige de rester aux hypotheses. Voila cependant comment je vois les choses :
 
On a un competition entre replieemnt et translocation. Dans un contexte normal (avec microsome), le repliement est lent donc la proteine est immediatement transloquee et se replie dans la lumiere du RE.  
En l'absence de microsome, la proteine commence a se replier mais elle le fait de facon aberrante en l'absence de glycosylations et des chaperonnes du RE. De surcroit, un proteine de grande taille est en general plus  delicate a replier. On parvient donc a une proteine mal repliee et/ou agregee, le peptide signal n'est plus accessible au translocon et donc la proteine n'est pas transloquee.

Si je peux me permettre, je comprends pas toute la manip... Les microsomes sont bien là pour mimer le RE?

Les microsomes sont des fragments de membranes de RE (contenant les lipides et la machinerie proteique). Ce sont des compartiments fermes : les proteines secretees sont donc transloquees a l'interieur des microsomes

Si je comprends bien, pendant/après traduction, les protéines issues des ARN "petit" et "moyen" passent dans les microsomes où elles sont N-glycosylées. Du coup, la protéase ne fait rien tandis que l'endoH sépare la protéine de ses mannoses, d'où la taille plus faible.

Pour l' ARN long, la protéine synthétisée peut être transloquée dans le microsome pendant sa traduction et son destin suit celui de ses petites amies.

Par contre, si les microsomes sont ajoutés après, la protéine est incapable d'être transloquée dans le microsome (elle est trop grosse / conformation pas terrible / peptide signal qui en prend un coup / pores pas contents ou que sais-je...), du coup elle n'est pas dégradée par la protéase, et, comme elle n'est pas N-glycosylée (puisqu'incapable de passer dans le microsome), l'endo H n'a aucun effet sur elle.

Bien.

Mais les COS-7 n'ont pas un RE et un golgi? Pourquoi les protéines n'y seraient pas N-glycosylée?

Ou alors je rate vraiment quelque chose

 
1- Dans le milieu reactionnel, il y a juste l'interieur et l'exterieur des microsomes. L'interieur correspond a la lumiere du RE (ou ls proteines secretees sont glycosylees/repliees) et l'exterieur au cytoplasme (on y trouve les ribosomes). Les proteines non transloquees sont donc bloquees a l'exterieur et accessibles aux proteases (on n'observe aucune bande sur le gel correspondant a cette condition).
 
2- Les COS7 sont des cellules de mammiferes et a ce titre elles ont tout l'attirail classique des eucaryotes avec un RE et un Golgi. Cependant, la N-glycosylation se produit dans la lumiere du RE apres translocation. DOnc en l'absence de translocation, la proteine ne peut pas etre N-glycosylee.

My mistake, ma fourche a langué, il fallait lire "la protéine est dégradée"

Mais c'est justement ça que je ... Ah putain mais ouais, apprends à lire gros La traduction se fait in vitro, pas dans les COS-7
 
C'est bon, je crois que je l'ai
 
Merci

Qui veut synthétiser des bactéries
 
http://www.sciencemag.org/cgi/rapi [...] 0719v1.pdf
 
N'empêche sacré boulot mais y'en a déjà pour crier qu'il a ouvert la boîte de Pandore
 
Et ici un résumé du travail de Venter:
 
http://www.sciencemag.org/cgi/reprint/328/5981/958.pdf

En recherche de thèse, je regarde actuellement du coté de Göttingen (Graduate School for Neurosciences and Molecular Biosciences aka GGNB). Quelqu'un connait? Y est passé une semaine en vaconference? En train sans s'arreter? Connait un gus qui a entendu parler d'un gars qui a une connaissance dont la femme du cousin a vu une émission qui en parlait à la TV?

Göttingen c'est plein de géologues

tu peux postuler chez moi   Nancy, c'est bien aussi  

 
Oui enfin la Lorraine au bout d´une heure tu t´y ennuies deja. D´ailleurs je ne comprends meme pas qu´il y ait encore des habitants la-bas, c´est un peu comme le Limousin en fait. Il faut vraiment que tu aies un super sujet de these a proposer parce que ca sera sa seule occupation pour les trois quatre six annees a venir

Tu cherches quel sujet ?

de toute façon, la thèse, c'est comme le post-doc, t'y va pas pour le tourisme, mais pour publier    
Le sujet est forcément hyper intéressant, et surtout à bon potentiel de publication. Ensuite, chez moi, c'est 3 ans max, la thèse; avec potentielle embauche dans le privé rapidement, vu le sujet.
Ensuite... tu connais la Lorraine ou le limousin ? Je pourrais faire le même genre de réflexion sur Munich, rempli de facho buveurs de bières et mangeur de bradwurst   . Après,  si tu y as vécu 10 ans, je comprendrais

En gros, j'ai une formation bien batarde et je sors de master pro. J'ai fait bioch puis "Phytoressources", dc en gros, purif, identification et valorisation de molécules naturelles végétales.
Une thèse CNRS à laquelle j'ai postulée et qui me botte vraiment, ca donne ca:

Un mélange de bioch valorisant des extraits naturels, et de neuro, tout ce que j'aime  
Vu mon parcours, de toute facon, je dois me lancer sur un sujet totalement nouveau pour moi. Donc j'aimerais rester dans de la valorisation de molécules naturelles, soit dans le domaine de la neuro (j'adore ca), donc dans une approche pharmacognosie, soit dans de l'environnement-écologie-sauver le monde-allez les verts!  
 
 
J'ai failli envoyer un mail à Merlin avt hier d'ailleurs pour lui demander s'il avait des pistes...

 
Buveurs de biere et bouffeurs de bratwurst, oui mais facho pas tellement, ils votent meme a gauche a Munich. Par contre, tout autour ce sont clairement des cathos integristes bouffeurs de biere et buveurs de bratwurst
 
Pour les theses, c´est vrai qu´ils ont limite ca a trois ans en France desormais. Ca permet d´eviter pas mal de derives par contre ca augmente fortement le risque de theses sans publis pour peu que ton sujet soit foireux. Pour ceux qui travaillent en animal notamment et pour lesquels les manipes sont tres lentes, ca risque d´etre assez tendu. Meme dans mon domaine en cristallo, trois ans ca peut etre court si a proteine a cristalliser s´avere plus retorse que prevue (c´est a dire au moins 50% du temps)
 

tiens ils sont rémunérés combien les thésards en France ?

[mode doctorant] pas assez   (dans les 1300?)
[mode directeur] 34k€    

34000 ? Ah ouais, comme en Suisse.
(mais c'est du brut. )

Le montant mensuel brut de ces contrats est fixé à 1 757 €.
Si le doctorant se voit confier, en plus de son activité de recherche doctorale, une activité complémentaire telle que définit dans le décret n° 2009-464 du 23 avril 2009 relatif aux doctorants contractuels des établissements publics d’enseignement supérieur ou de recherche, le montant de la rémunération sera porté à 2 095,08 € brut mensuel.

Putain ici c'est 1000 net

T'as quoi comme bourse à la fois? DFG?

Ouais projet DFG.

heu c'est quoi DFG ?
pour les 34k€, c'est le brut "patronal" ; tu retires 40% pour avoir le net salarial.

Faut venir faire une thèse en Belgique alors...
 
c'est aux environs de 1700euros net par mois  .  Et la vie n'est pas plus chère qu'en France

tu m'étonnes c'est difficile de faire pire... quoique en Italie... j'ai fini ma thèse en 2005, je devais être 10% au dessous du SMIC... mais tout de même imposable  

 
Deutsche Forschungsgemeinschaft, un peu l'équivalent du CNRS.
Et moi en brut patronal, je suis à 24k€, tu retires 50% pour avoir le net salarial.
 
KONFISKATVAHR §§§

gott verdammt ! Et tu arrives à vivre avec ça  

Yep, et même à mettre de côté (disons, de quoi payer mes déplacements pros qui me sont remboursés 3 mois + tard ). La vie à la capitale est vraiment pas chère...

2'250 euros net par mois en Suisse.
(en première année évidement, ça monte ensuite. )

aux pays bas aussi c'est indexé... 2250, je touche pas ça en étant statutaire