Reprise du message précédent :

 
lol te vexes pas
mais comment alors je peux voir si j ai des proteines si j ai pas de lyce de ma cellule a la premiere?

 
 
Tu commences maintenant a comprendre pourquoi je cherche a savoir ou se situe cette toxine? Et comment elle est relachee a l'exterieur?
A partir de ce moment, on comprendra mieux le protocole. Reste que je me demande pourquoi tu viens pose cette question ici

 
C'est sur, vaut mieux pas eternuer dedans, c'est une bactos anaerobique. Et si cela se produisait, la dose mortelle est de 30pg/kg de viande fraiche. Me demandes vriament pourquoi il serait utile d'optimiser la production de cette cochonnerie. Sont en manque pour le botox ou quoi?
Une conserve mal sterilisee et je t'en produit 10t

 
ben c est mon cop qui m a conseille ce forum ...
Mais ca doit pas etre tres important la facon dont elle est secretee ca doit etre comme ttes les autres proteines sinon mon maitre de stage m aurait fait un top dessus

 
pour le cop qui te conseille de venir ici
 
Ensuite, demande a ton maitre de stage, je n'ai pas pu trouve comment est relachee la proteine active.

 
bon et ben merci quand meme mais mon maitre de stage est en vacances !!!!!

c'est bien du PBS et pas du SDS par hasard.
Pour les gels electrophorétiques c'est ce qu'on utilise pour dénaturer les proteines.

non c bien du PBS

Je pense que c'est une erreure alors et que c'est du SDS qu'il fo utiliser .
PBS : solution de sels minéraux pour creer une certaine hypotonie
SDS : denaturant des protéines en la rendant onionique.
 

non ce n est pas une erreur il faut utiliser du PBS j ai deja fait tte les experiences et ca a tres bien fonctionne ... le SDS est utilise plus tard

Ds ce cas c'est juste un tampon de solubilisation.

 
A priori le PBS est là pour faire un lavage.
Je pense que le chauffage à 100° c'est pour dénaturer les protéines. ça doir permettre de séparer la toxine (150Kd) du complexe formé avec les ANTP.

Voila la reponse :
enfait le bleu que j utilise est compoe de SDS et de b-mercaptoethanol et de glycerol. Le SDS permet de charger l echantillon négativement , b-mercaptoethanol parmet de casser les ponts dissulfure et le glycerol alourdit l echantillon pour le faire tomber dans les puits.
 
Le fait de chauffer permet de denaturer avant de charger sur le gel. Et si j ai des coprs d inclusions ca va les dissocier.

 
base du gel d'électrophorèse, quelle que soit la protéine à étudier.
sinon dans un protocole sur internet ils disent que le PBS c'est pour le lavage.

 
YES!